UHPLC-MS/MS测定人血浆中美托洛尔的含量

目的 建立测定人血浆中美托洛尔含量的UHPLC-MS/MS分析方法。方法 采用Agilent RRHD PLUS C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）,0.2%甲酸水溶液-乙腈（68∶32）为流动相。质谱采用电喷雾离子源（ESI）,多反应监测（MRM）,检测离子为正离子,分别选择m/z 268/116、237/194作为美托洛尔和内标（卡马西平）的检测离子对。结果 血浆中美托洛尔在1.012~759.0 ng·mL^-1内线性关系良好（r=0.999 2）。高、中、低浓度美托洛尔的基质效应分别为105.9%,106.1%,106.9%;平均回收率分别为83.0%,99.3%,95.2%。批内精密度RSD≤3.22%,批间精密度RSD≤4.14%。结论 该方法简便、灵敏、快速、准确,适用于血浆中美托洛尔的含量测定。     

低温海水浸泡对大鼠血浆蛋白质组的影响研究

目的模拟海难落水所致重度低体温损伤,比较鉴定低温海水浸泡模型动物血浆蛋白质组差异,为研究低体温相关血浆蛋白提供线索。方法将50只雄性健康Wistar大鼠平均分成5组,分别在低温海水中浸泡0、2、4、6、10 h后采集下腔静脉血。分离血浆后,用试剂盒去除Ig G和白蛋白等高丰度蛋白,并经过除盐后采用蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离。对差异1.5倍以上的蛋白斑点,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行肽质量指纹图谱分析,应用NCBI或Swiss-prot数据库鉴定差异蛋白质。结果大鼠浸泡在15℃海水中,中心体温(肛温)迅速下降,浸泡30 min降至19℃,浸泡120 min降至16℃左右,体温维持不变,说明进入重度低体温状态。初步鉴定出3个与低温相关差异蛋白,肺表面相关蛋白A(SP-A)、丝氨酸蛋白酶抑制剂A3K(SPA3K)和抑制物组织基质金属蛋白酶抑制剂-3(TIMP-3)。与正常大鼠相比,这3个蛋白的表达水平均随着低温海水浸泡时间的延长明显上调。结论低温海水浸泡后的大鼠血浆蛋白质组相对正常大鼠血浆蛋白质组有改变。研究差异蛋白有助于阐明低温损伤的分子机制,为研究和治疗低体温症提供靶标。     

RP-HPLC法同时测定人血浆中左乙拉西坦、奥卡西平及其活性代谢产物的浓度

目的：建立同时测定人血浆中左乙拉西坦、奥卡西平及其代谢产物单羟基卡马西平的含量测定方法,为左乙拉西坦与奥卡西平联合用药治疗癫痫提高临床疗效与用药安全性提供指导。方法：患者血浆样品经乙酸乙酯-二氯甲烷（70：30）沉淀蛋白处理后,以β-萘酚做内标,采用RP-HPLC法同时测定左乙拉西坦、奥卡西平及单羟基卡马西平的含量。色谱柱为Agilent C₁₈反相色谱柱,流动相为：乙腈（A）-水相（B）（由0.3%三氟乙酸与10 mmol·L^-1甲酸铵溶液按2：1体积比混合）梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,进样量10 μL,内标为β内萘酚,检测波长为210 nm （0~13 min）、225 nm （13~25 min）。结果：LEV、OXC、MHD血药浓度分别在2.0~60.0、2.0~60.0、3.0~96.0 μg·mL^-1范围内线性关系良好（r分别为LEV 0.999 7、MHD 0.999 6、OXC 0.999 8）,定量下限分别可达到2.0、2.0、3.0 μg·mL^-1;各组分的日内、日间精密度RSD均小于4%,各方法平均回收率均大于96%,LEV、OXC、MHD低、中、高3个浓度的提取回收率均>85%,稳定性的RSD均<15%。结论：该方法操作简便、快捷,专属性强,结果准确可靠,可用于左乙拉西坦、奥卡西平及其代谢产物单羟基卡马西平的临床血药浓度监测。     

高效液相色谱法同时测定人血浆中卡马西平、奥卡西平及其活性代谢产物的浓度和临床应用

目的：建立同时测定人血浆中卡马西平（CBZ）、10,11-环氧卡马西平（CBZE）、奥卡西平（OXC）和单羟基卡马西平（MHD）浓度的高效液相色谱法,并将其应用于临床中卡马西平、奥卡西平及其活性代谢产物血药浓度的测定。方法：以苯巴比妥为内标,血浆经乙醚-二氯甲烷（2∶1）提取。色谱柱为WondaSil C₁₈柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇∶水=50∶50,柱温30℃,流速1.0 mL·min^-1,检测波长215 nm,进样量20 μL。结果：卡马西平、10,11－环氧卡马西平、奥卡西平和单羟基卡马西平标准曲线范围分别为0.1~20,0.05~10,0.05~20,0.2~50 mg·L^-1,最低检测限分别为0.1,0.05,0.05,0.2 mg·L^-1,日内、日间精密度均小于10%。结论：该方法灵敏准确,简便快速,适用于卡马西平、奥卡西平及其代谢产物血药浓度检测。     

HPLC-MS/MS法定量研究氧化白藜芦醇对沙奎那韦在大鼠体内药动学的影响

目的:应用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术建立大鼠血浆中沙奎那韦的定量测定方法,并用于氧化白藜芦醇对沙奎那韦在大鼠体内药动学研究。方法:液相色谱分离采用C₁₈反相色谱柱(150mm×2.1mm,5.0μm),流动相为乙腈/水(含0.2mmol·L^-1甲酸铵),流速为300μL·min^-1;质谱检测采用电喷雾正离子(ESI^+)模式,多反应监测。血浆样品采用液-液萃取方式提取,检测反应为m/z671.4→570.4(沙奎那韦),m/z721.4→296.2(利托那韦,内标)。将10只SD大鼠分为2组,对照组与实验组分别灌胃给予沙奎那韦(30mg·kg^-1)、沙奎那韦(30mg·kg^-1)+氧化白藜芦醇(40mg·kg^-1),于不同时间取血,测定血药浓度。结果:沙奎那韦在1.0~100.0ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=0.998 5),日内和日间精密度均小于12.16%,偏差为0.89%~6.24%,回收率为67.85%~82.38%,血浆样品稳定性好。同时服用氧化白藜芦醇时,大鼠体内沙奎那韦达峰浓度C_max、C_max1显著降低,而C_max、T_max、t_1/2、CL/F均无显著差异。结论:HPLC-MS/MS测定方法准确度高、专属性强、灵敏度高、快速高效。沙奎那韦的药时曲线存在双峰现象;氧化白藜芦醇可以显著降低沙奎那韦的达峰浓度,但对口服生物利用度等其他药动学参数没有显著性影响。     

高脂血症患者细胞色素P450 3A4~* 18B基因多态性对辛伐他汀稳态血药浓度及其对降脂疗效的影响

目的分析高脂血症患者细胞色素P450 3A4~*18B(CYP3A4~*18B)基因多态性对辛伐他汀稳态血药浓度及其对降脂疗效的影响。方法 115名高脂血症患者均予以辛伐他汀每次20 mg,qd,口服,连续用药4周。在治疗前和治疗后,分别抽取空腹外周静脉血2 mL,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法分析CYP3A4~*18B的等位基因,用全自动生化分析仪测定血总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等。在最后一次服药前0.5 h内,抽取外周静脉血4 mL,用HPLC法测定血中辛伐他汀的稳态药物浓度。结果 115名高血脂症患者中,CYP3A4~*18B基因型分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡(P>0.05),CYP3A4~*18B等位基因突变率为41.74%。CYP3A4~*1/~*1、CYP3A4~*1/~*18B和CYP3A4~*18B/~*18B的辛伐他汀稳态血药浓度分别为(4.88±0.44),(4.90±0.38)和(4.71±0.36)ng·mL^-1,总胆固醇分别为(5.78±0.47),(5.84±0.47)和(5.82±0.52)mmol·L^-1,低密度脂蛋白胆固醇分别为(2.63±0.04),(2.60±0.08)和(2.58±0.12)mmol·L^-1,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 CYP3A4~*18B基因多态性对辛伐他汀稳态血药浓度及降脂疗效无明显影响。     

Progranulin as a therapeutic target for dementia

Introduction: Progranulin (PGRN) is an acrosomal glycoprotein that is synthesized during spermatogenesis. It is overexpressed in tumors and has anti-inflammatory properties. The protein may be cleaved into granulins which display pro-inflammatory properties. In 2006, mutations in progranulin gene (GRN) that cause haploinsufficiency were found in familial cases of frontotemporal dementia (FTD). Patients with null mutations in GRN display very low-plasma PGRN levels; this analysis is useful for identifying mutation carriers, independent of the clinical presentation, and in those before the appearance of symptoms.

Areas covered: Here, we review the current knowledge of PGRN physiological functions and GRN mutations associated with FTD; we also summarize state of the art clinical trials and those compounds able to replace PGRN loss in preclinical models.

Expert opinion: PGRN represents a promising therapeutic target for FTD. Cohorts suitable for treatment, ideally at the preclinical stage, where pathogenic mechanisms ongoing in the brain are targeted, are available. However, PGRN may have side effects, such as the risk of tumorigenesis, and the risk/benefit ratio of any intervention cannot be predicted. Furthermore, at present, the situation is complicated by the absence of adequate outcome measures.     

Indocyanine green loaded hyaluronan-derived nanoparticles for fluorescence-enhanced surgical imaging of pancreatic cancer

Pancreatic ductal adenocarcinoma is highly lethal and surgical resection is the only potential curative treatment for the disease. In this study, hyaluronic acid derived nanoparticles with physico-chemically entrapped indocyanine green, termed NanoICG, were utilized for intraoperative near infrared fluorescence detection of pancreatic cancer. NanoICG was not cytotoxic to healthy pancreatic epithelial cells and did not induce chemotaxis or phagocytosis, it accumulated significantly within the pancreas in an orthotopic pancreatic ductal adenocarcinoma model, and demonstrated contrast-enhancement for pancreatic lesions relative to non-diseased portions of the pancreas. Fluorescence microscopy showed higher fluorescence intensity in pancreatic lesions and splenic metastases due to NanoICG compared to ICG alone. The in vivo safety profile of NanoICG, including, biochemical, hematological, and pathological analysis of NanoICG-treated healthy mice, indicates negligible toxicity. These results suggest that NanoICG is a promising contrast agent for intraoperative detection of pancreatic tumors.     

反相高效液相色谱法测定人体胺碘酮血药浓度

目的建立HPLC法测定血浆中胺碘酮浓度的方法.方法采用反相高效液相色谱法测人体胺碘酮血药浓度.C18柱,流动相为乙腈-冰醋酸-三乙胺(940:60:0.0033,V/V).检测波长242 nm.结果在0.5～8.0 mg·L-1浓度范围内线性良好,最低检测限为0.3 mg·L-1,平均回收率为80.20%～96.03%.日内误差小于6%,日间误差小于10%.并用HPLC法测定了26例患者服用胺碘酮后的体内血药浓度.结论HPLC法操作简便、快速、准确,可用于胺碘酮的临床监测.